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分光光度計的在測量時應注意事項

點擊:   作者:天友利標準光源有限公司      發布日期:2014-07-08
吸收光譜測量發源于分析化學。利用不同的物質具有不同的吸收峰的特性,通過吸收光譜測量可以作物質的楊分分析;利用一定條件下溶液的濃度與其吸收度的依賴關系,通過吸收光譜測量可以作物質的含量分析。由此看來,作為吸收光譜測量基本儀器——分光光度計乃是分析化學
  吸收光譜測量發源于分析化學。利用不同的物質具有不同的吸收峰的特性,通過吸收光譜測量可以作物質的楊分分析;利用一定條件下溶液的濃度與其吸收度的依賴關系,通過吸收光譜測量可以作物質的含量分析。由此看來,作為吸收光譜測量基本儀器——分光光度計乃是分析化學的重要手段之一。如1.1所述,試樣的吸收度是通過內透射比計算的,而透射比是光輻射測量中的物理量之一,所以,就其本質而言,吸收光譜測量的主要量乃是光學輻射量。分光光度計從它誕生日起,除了測量溶液之外,也測量諸如玻璃、晶體這類的固體材料,隨著現代工業的發展,固體試樣越來越多。國內外從事光輻射計量的實驗室先后發展基準分光光度計,復現光譜透射(吸收度)標,并開展室際之間的量值對。
  下面分別介紹吸收光譜測量的基礎——比耳朗伯定律,與吸收測量有關的誤差源,以及測量過程中的注意事項。
2.1.1   比耳朗伯定律
     在光譜光度法中有一個重要的情況,除了規則透射能量фr以外,通過試樣之后不產生其它通量,而且吸收體是由無聯系的原子或分子組成的.在這種情況下,透射能量與試樣的某些通量參數之間存在一個非常重要關系式,這就是著名的比耳朗伯(Beer-;a,bert)定律。在應用這一定律時,必須已知試樣的參數,即光束通過試樣的光程長(對于固體試樣,即試樣厚度),吸收體的濃度或摩爾吸收率。
當吸收體是無相互作用的原子或分子時,比耳朗伯定律是有效的,這一條件僅僅適用于低壓下的理想氣體。實際上,比耳朗伯定律是可以成功的應用于濃度范圍相對大的稀釋溶液。在高濃度時,吸收體開始形成聚合物,從而引起摩爾吸收率的變化。比耳朗伯定律適用性的另一條件是,除了能量фr以外,其它通量為零。對準理想溶液這一條件是容易滿足的,但當試樣出現熒光或出現光學混濁時就不能完全滿足。有一些物質明顯偏離比耳朗伯定律,這往往是不良的實驗過程或試樣條件控制不好造成的。
2.1.2  吸收度測量的誤差源
     將吸收度的測量誤差分為兩在類考慮為宜。第一種誤差源于光譜光度計;第二種誤差直接或間接地與光度光度計的使用有關。實際上這兩種誤差是很難截然分開的。
1.  分光光度計的局限性
首先,必須區分透射比或吸收度這兩個量的工作定義與真實透射比或真實吸收度之間的差異。
2. 反射損失
     如果試樣和參比皿的質量很高,則外表的損失 可以忽略;在液體與熔融石英的界面上,反射損失也可忽略,因為在紫外吸收光譜測量中,溶質的濃度是非常低的。在充水的熔融石英皿中的內反射損失,對于589.3nm波點僅占入射通量的0.4%。
3. 散射損失
在混濁試樣中,細小的不導電粒子會顯示出廷德爾(Tyndall)散射現象,其強度正比于頻率的四次方。這會產生非常嚴重的問題,特別在短波區明顯地偏離比耳-朗伯定律。有經驗的測試人員應設法克服這種誤差
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